?我如何确保RCCS-3D微重力三维培养系统培养所需氧气？
我如何确保RCCS-3D微重力三维培养系统培养所需氧气？
正如前面提到(问题5)，生物反应器是放置在恒温箱里的。根据培养所需，通过硅树脂氧合器，恒温箱中的空气会扩散入培养皿中。如果有较大的培养容器，有泵可以使恒温箱的空气供给满足培养所需。因为所有的气体传输是通过扩散完成，因而全过程不会产生气泡和湍流。组织培养，根据定义，尽量模拟体内环境，并且很显然，活着的生物日是三维的，而不是二维的。
现在认为，常规方法无法实现完全意义上的组织重建， 即由离体细胞完全在体外重建组织。其主要原因是:静止培养时，由于培养容器中的营养物质、气体及代谢产物浓度不均一， 容易导致载体内代谢废物蓄积，局部pH 值升高，中心部位的细胞不能获得充足的养分，250ml转壁式培养容器，生长迟缓或停滞[9] 。因而细胞只能呈单层生长，细胞密度低，无分化现象。搅拌式发酵罐培养虽然可以克服静止培养的缺点，但由于培养液被搅动时产生的高剪切力，转壁式培养容器，极易损伤细胞，并抑制细胞的组织特异性分化。搅拌培养一般只能获得直径在1mm以下的多细胞球状体，细胞呈现轻度分化，细胞球状体中心常出现细胞坏死。更重要的是，在常规培养方法中，由于重力的作用，分离的细胞在培养液中自然沉降，限制了细胞与细胞、细胞与基质之间的三维随机组合与共同定位(co - localization) ，细胞间无法实现类似胚胎发育过程中的三维接触和按极性的定向排列，因此只能呈现二维生长，在培养器皿表面平铺，不能形成立体结构[10]。生物反应器必须放在恒温箱里，恒温箱的温度可以设定和维持在37℃。
生物反应器模拟的微重力环境弥补了常规细胞培养的缺点，开辟了体外细胞培养的新纪元，也为组织构建提供了技术支持。
模拟微重力环境具有如下特点:①低剪切力对细胞无机械性损伤，它是通过固体旋转匹配微载体和培养液的浓度来实现的；②富含氧而不引起涡流，物流转移***。气体渗透膜则提供了被动的气体交换，它为适宜的生长环境提供了气体，防止了湍动引起的气泡/气室[11]；③随机化的重力向量(randomized gravitational vectors) 可能直接影响基因表达，10ml转壁式培养容器，或间接促进细胞自分泌/ 旁分泌，有利于细胞间信号转导 ；2模拟微重力环境，客服了细胞的自由落体，使得细胞更容易生长并形成三维的组织结构，保留更多的生物特征。④细胞有一定程度的自由三维空间，有利于细胞—细胞、细胞—基质间按组织学特性相互接触，50ml转壁式培养容器，有利于细胞分化，且不易形成坏死中心[10]；⑤微重力在组织培养时还具有高保真度的优点。
————本文摘自网络，著作权归原作者所有！
RCCS-3D模拟微重力三维细胞培养系统是一种动态培养系统！
1 培养过程中，细胞或组织悬浮于培养液中并随同培养液低速旋转、运动，更贴近于生命体内的真实环境；
2 且动态环境下生产的细胞体或组织能够更好的继承和保留原有的生物特性，更能满足实验的要求和真实的反应实验的结果；
1 通常为静态的培养，无法正确的表达生命体原有的特性；
2 部分通过机械的震荡或叶片的搅拌实现动态的悬浮，但无论是震荡还是搅拌，都会在培养液内产生一定的剪切力，这些力会严重的影响细胞的生产，并有可能改变细胞的正常形态；
