模拟微重力的回转系统由谁发明的?
模拟微重力的回转系统由谁发明的?
NASA工程师开发了在地球上提供“模拟微重力”的旋转壁容器(RWV)生物反应器。 装置的旋转运动抵抗重力以将细胞保持在“模拟微重力”环境中。 在这些条件下,在旋转壁血管内生长的细胞聚集在一起形成与3D组织结构相当的3D多细胞结构或团块,如果不同的细胞类型一起培养,甚至更多(7)。 该装置在1993年工业生产,灌注式RCCMAX,并且因为许多人已经对用RWV获得的3D培养物进行了重要研究。目前我们所熟知的RCCS-3D旋转三维细胞培养系统,其核心也是来源于此!3D培养体系为细胞提供类似体内生长环境的支架或基质,细胞通过紧密连接或缝隙连接等连接方式建立细胞间及细胞与胞外基质间的联系,形成一定的三维结构,与体内细胞生长情况更为相似。
Kinoshita等[14] 将骨祖细胞接种于三维网状胶原支架内复合培养, 12周后检测发现骨祖细胞在该状态下出现良好的增殖分化表现, 形成了类似于正常骨组织的结构。将细胞与材料复合体置于培养瓶中进行简单的三维培养时, 出现了细胞分布不均匀、深部细胞营养交换障碍等问题,RCCMAX连续灌流, 因此目前进行三维培养时往往需要使用生物反应器。
研究表明, 旋转式细胞培养系统比较适宜培养组织工程骨。Terai 等[15] 将旋转式细胞培养系统增加气体交换装置后, ***解决了支架材料中O2 渗透和CO2 排除的问题,BMSCs 与聚乳酸/乙醇酸(PGLA) 构建的组织工程骨在该反应器中,培养 2 周时出现钙化情况,RCCMAX, 培养 7 周时细胞即被形成的骨样组织包裹。自由落体技术已经实施了PetakaG3缺氧minichamber,以产生微重力像3D细胞聚集在地球上。____摘录自“模拟微重力培养在骨和组织工程中的应用”
旋转式细胞培养系统(以下简称RCCS)生物反应器是如何工作的?
RCCS生物器是由中心的一个同轴氧合器以及一个水平旋转培养皿所构成的。当培养皿充满培养基并且旋转时,培养基像固体一样围着水平轴旋转。氧合器与容器壁以相同的角速度旋转。这些条件使得培养容器内产生层流和x小的剪切力。细胞由离心力,重力和科式力作用而成悬浮状态,因此在RCCS生物反应器的细胞受到X小的机械应力和高通量运输(营养物质,氧气等)因而能聚集形成类组织聚合物。气体传输通过硅树脂氧合器传输,从而避免气泡的形成和湍流。当培养皿充满培养基并且旋转时,培养基像固体一样围着水平轴旋转。
与其他三维细胞培养系统相比,RCCS生物反应器的优点是什么?
将细胞嵌入盘或者多孔板的三维细胞外基质为近常用的三维细胞培养方法。
这个方法虽然可以产生相对不错的3D组织模型,但是它又被有限的物质传递(这是由于培养的静态特性,也因为基质对于物质传输是一个额外的屏障)和缺乏可测量性所限制。 动态的培养系统,例如搅拌瓶,RCCMAX连续灌注,或者大规模的搅拌罐提供了非常好的物质传递,但是这些系统使用的机械应力,不仅损坏细胞,而且还阻止了它们的聚集。 如前所述, RCCS生物反应器提供了非常好的质量传递和低机械应力允许了3D聚合物的形成。两个基本的物理因素是本研究的目标:重力和电磁辐射对活生物体的影响,从单细胞到胚胎发育和到成熟X的复杂生物体。
很多基于本生物反应器的研究显示了其在3D细胞培养方面的优势。