RCCS-3D旋转微重力三维细胞培养系统相关专利介绍
06、专利号5,026,650“具有同轴管状氧化器的水平旋转细胞培养系统”专利 1991年 6月25日授权
07、专利号5,153,131“高等效比容器及其使用方法”1992年10月6日授权的专利
08、专利号5,155,035 1992年10月13日授权的“用于培养生物反应器中培养马马里亚细胞的方法”专利
09、专利号5,153,133“水性旋转生物反应器中培养马马里亚细胞的方法”1992年10月6日授权
10、1999年12月7日授权的专利号为5,RCCS-2HD,998,202的“多室扩散船”专利
11、专利号5,989,913“用于培养或培养细胞的培养皿, 细胞聚集体, 组织和有机物及其使用方法”1999年11月23日授权的专利
一百年前,悬滴法是微生物学常用的,用这种方法,罗伯特·科赫能够次看到显微镜下培养的杆X菌X和活埃博拉病毒弧菌在埃及的污染水域。 该方法很简单:只需将一滴含有微生物的水放在显微镜载玻片的表面上,并用快速手转将其倒转,使水滴从载玻片上悬浮,由表面张力维持。 在水滴内,微生物自由移动并且可以用光学显微镜观察。 水滴内的微生物被限制在水滴中,不能穿过水 - 空气界面,因此不能接触表面而附着。 相同的原则,今天使用创建微观3D细胞聚集。正常的动物细胞,人类细胞,贴壁依赖或悬浮细胞、肿X瘤细胞以及脆弱的单或共培养物通过传统的培养方法都已经实现了体外培养。
大约在同一时间,大约1880年,儒勒·凡尔纳出版了一个讽刺小说“从地球到月球”,关于人类在空间飞行,在炮X弹X壳内到达地球的卫X星的可能性。 但是,只有大约一百年后,人类在月球上行走,RCCS-4HD,由火箭和推进装置的复杂组合X运输。
早在1961年,美国科学家对研究太空飞行对细胞生物学的影响感兴趣,RCCS,并在Discoverer卫X星XXIX和XXX(1)(2)中进行器X官和细胞培养实验。 两个基本的物理因素是本研究的目标:重力和电磁辐射对活生物体的影响,从单细胞到胚胎发育和到成熟X的复杂生物体。而大部分动态培养系统中,细胞或组织是有物理的外力而悬浮的,有许多包括液态剪切力在内的因素会导致细胞及组织损伤。
从1966年到1969年,NASA推出了“生物卫X星”作为研究计划的一部分,以评估航天,特别是微重力对生命过程的影响,研究基本的细胞生物化学,细胞和组织的生长结构,生长和植物和动物的形式。 类似地,一个国际科学家组织与Cosmos 1129进行的另一个生物空间研究计划提供了关于和生物发育行为的重要数据,通过用胡萝卜胚胎证实微重力中培养的可以产生胚胎和体细胞胚,并且空间低重力环境可以支持已经组织的体细胞胚的正常生长,产生完全发育的苗(3)。从所有这些早期实验获得至少两个基本结论:A)细胞寿命和一般结构不是重力依赖性的。RCCS生物反响器的次要目的将使作用在细胞上的机械应力减到X小。 B)胚发生也是重力无关的
在20世纪80年代的航天飞行任务期间,NASA生命科学部门对微重力对细胞行为的影响进行了研究。 这项研究的主要目的是分析对生物的失重状态的影响,因为在轨道这是正常的环境。 不幸的是,由于在货物的预发射载荷和轨道飞行阶段之间,细胞不处于微重力条件下的事实,结果是不确定的。 在这些实验之后,科学家意识到这种在空间飞行器上进行的研究是有限的,但它可以在地球上用特殊技术模拟。 不久,重力归/令人不安的仪器,如回转器,随机定位机(RPM),自由落体机(FFM)和抛物线飞行飞机被开发。因而RCCS生物反响器是零顶部空间操作,并且气体传输是经过分散完成以此来避免气泡的构成。
细胞是否在RCCS生物反应器的一个地方停留?
不,细胞和细胞聚集体会在培养基中漂浮,这是生物反应器中观察到的高物质传输的重要因素之一。
.如何保持微重力生物反应器里的温度?
生物反应器必须放在恒温箱里,恒温箱的温度可以设定和维持在37℃。
我如何确保培养所需氧气?
正如前面提到(问题5),生物反应器是放置在恒温箱里的。根据培养所需,通过硅树脂氧合器,恒温箱中的空气会扩散入培养皿中。如果有较大的培养容器,有泵可以使恒温箱的空气供给满足培养所需。因为所有的气体传输是通过扩散完成,因而全过程不会产生气泡和湍流。然而,由于该系统提供的低剪切力、高质量营养物质传递和模拟微重力的独特环境很快显现出其***的优势,并可以应用在常规实验室培养箱中进行3D细胞培养。
培养容器应该以什么速度旋转?
这取决于细胞聚合体的直径。当容器转动时,细胞聚合体加速,直到他们到达沉积速度,而该速度取决于细胞聚合体的大小。根据斯托克斯方程,RCCS-4HQ,沉降速率随着细胞聚合体半径的平方而增加。因此,随着聚合体体积上的增加,它们沉降的更迅速,同时为了防止细胞聚合体与培养壁的碰撞有必要增加旋转速度。因此,一开始可能以慢速旋转培养,例如7rpm,当细胞聚合体在体积上增长并且变得可见,再增加旋转的速度。组织培养,根据定义,尽量模拟体内环境,并且很显然,活着的生物日是三维的,而不是二维的。