RCCS-3D(RWVB)模拟微重力三维培养系统在骨组织培养红的优点?以下链接为成功运用RCCS生物反应器进行3D细胞培养的各种不同研究的文献。
Kinoshita等[14] 将骨祖细胞接种于三维网状胶原支架内复合培养, 12周后检测发现骨祖细胞在该状态下出现良好的增殖分化表现, 形成了类似于正常骨组织的结构。将细胞与材料复合体置于培养瓶中进行简单的三维培养时, 出现了细胞分布不均匀、深部细胞营养交换障碍等问题, 因此目前进行三维培养时往往需要使用生物反应器。
研究表明, 旋转式细胞培养系统比较适宜培养组织工程骨。Terai 等[15] 将旋转式细胞培养系统增加气体交换装置后, ***解决了支架材料中O2 渗透和CO2 排除的问题,BMSCs 与聚乳酸/乙醇酸(PGLA) 构建的组织工程骨在该反应器中,培养 2 周时出现钙化情况, 培养 7 周时细胞即被形成的骨样组织包裹。5无法进行较长周期的培养,因为系统无法提供必要的养分和充分的与外界气体的交换。____摘录自“模拟微重力培养在骨和组织工程中的应用”
三维细胞培养RCCS-3D模拟微重力三维动态细胞培养系统研究目的?
微重力组织工程学是近年来美国空间生物技术研究人员***的一个独特研究领域, 其核心技术是建立动物细胞的三维培养体系。组织工程学的主要目的就是如何形成X好的3D 结构,达到满足器替代物的要求,或适于体外研究,如毒性等。微重力环境下有益于组织的重建,保持组织3D聚集时的特异性分化。RCCS具有的低剪切力可以有有效地促进细胞的附着,促进细胞间的联系,通过特异性的细胞粘附分子促进细胞的分化,保持高密度的细胞培养能力,可以直接影响基因表达能力。目前,RCCS-3D三维细胞培养系统包括RCCS-D﹨RCCS-2D﹨RCCS-4D﹨RCCS-8D﹨RCCS-4DQ﹨RCCS-8DQ以及RCCS-H﹨RCCS-2H﹨RCCS-4H﹨RCCS-2HD﹨RCCS-4HD和专用于培养的RCCS-SC﹨RCCS-2SC﹨RCCS-4SC﹨RCCS-4SCQ以及高X端的灌注式细胞培养系统RCMW﹨RCMW-DUAL等多种规格的系统!国内外大量的实验结果表明,采用RWVB可以模拟产生微重力条件下的生物效应,可以作为模拟微重力生物效应的有效手段。
———部分文字摘录自“微重力反应器在细胞培养中的应用”
现在认为,RCCMAX,常规方法无法实现完全意义上的组织重建, 即由离体细胞完全在体外重建组织。其主要原因是:静止培养时,由于培养容器中的营养物质、气体及代谢产物浓度不均一, 容易导致载体内代谢废物蓄积,局部pH 值升高,RCCMAX连续流,中心部位的细胞不能获得充足的养分,生长迟缓或停滞[9] 。因而细胞只能呈单层生长,细胞密度低,无分化现象。搅拌式发酵罐培养虽然可以克服静止培养的缺点,灌注式RCCMAX,但由于培养液被搅动时产生的高剪切力,极易损伤细胞,并抑制细胞的组织特异性分化。搅拌培养一般只能获得直径在1mm以下的多细胞球状体,细胞呈现轻度分化,细胞球状体中心常出现细胞坏死。更重要的是,在常规培养方法中,由于重力的作用,分离的细胞在培养液中自然沉降,限制了细胞与细胞、细胞与基质之间的三维随机组合与共同定位(co - localization) ,细胞间无法实现类似胚胎发育过程中的三维接触和按极性的定向排列,因此只能呈现二维生长,灌注系统RCCMAX,在培养器皿表面平铺,不能形成立体结构[10]。生物反应器必须放在恒温箱里,恒温箱的温度可以设定和维持在37℃。
生物反应器模拟的微重力环境弥补了常规细胞培养的缺点,开辟了体外细胞培养的新纪元,也为组织构建提供了技术支持。
模拟微重力环境具有如下特点:①低剪切力对细胞无机械性损伤,它是通过固体旋转匹配微载体和培养液的浓度来实现的;②富含氧而不引起涡流,物流转移***。气体渗透膜则提供了被动的气体交换,它为适宜的生长环境提供了气体,防止了湍动引起的气泡/气室[11];③随机化的重力向量(randomized gravitational vectors) 可能直接影响基因表达,或间接促进细胞自分泌/ 旁分泌,有利于细胞间信号转导 ;④细胞有一定程度的自由三维空间,有利于细胞—细胞、细胞—基质间按组织学特性相互接触,有利于细胞分化,且不易形成坏死中心[10];Synthecon公司于1990年创立,创立者为NASA细胞研究计划中的发明人。⑤微重力在组织培养时还具有高保真度的优点。
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