RCCS三维细胞培养与二维细胞培养的技术介绍？RWVB(RCCS-3D)微重力三维培养系统1990年，Kleis等人首先研制了一种生物反应器，随后美国国家航空与宇宙航行局(NASA)对此进行改进研制了RWVB即转壁式生物反应器，并应用到组织培养领域。
三维细胞培养——3D Cell Culture( Three-Dimensional Cell Culture)，通常是指更真实的模拟体内环境三维培养，当然完全的***真实模拟生物体内的微环境，目前是无法做到的，但相对于传统的二维细胞培养，则具有更多的优势！目前应用多的是二维细胞培养，有的是指单层细胞培养，从目前的学术文献来看，力学的影响因素是比较重要的因素之一，动物或人体无时无刻都有一个力学加载的环境，无论是站着、躺着、坐着和行动者，受到拉伸载荷或压缩载荷，管道系统会受到搏动或脉动的收缩压力和舒张压力，RCCS-4H，管道系统有血管、胆管、尿管等等，目前更多的学术界的研究者认识到二维（2D）细胞培养的限制，RCCS-4DQ，现在的事实是，他们不重现在原有的组织细胞拥有的形态和生化特征。作为一种更***的替代方法，三维（3D）的细胞培养方法，研究人员提供研究细胞生长和分化的条件下，更加紧密地在体内的情况类似，细胞形态和细胞环境方面的可能性。
现在认为，常规方法无法实现完全意义上的组织重建， 即由离体细胞完全在体外重建组织。其主要原因是:静止培养时，由于培养容器中的营养物质、气体及代谢产物浓度不均一， 容易导致载体内代谢废物蓄积，局部pH 值升高，中心部位的细胞不能获得充足的养分，生长迟缓或停滞[9] 。因而细胞只能呈单层生长，细胞密度低，无分化现象。搅拌式发酵罐培养虽然可以克服静止培养的缺点，但由于培养液被搅动时产生的高剪切力，极易损伤细胞，并抑制细胞的组织特异性分化。RCCS-3D模拟微重力三维动态培养系统可模拟微重力环境用于细胞、组织生长。搅拌培养一般只能获得直径在1mm以下的多细胞球状体，细胞呈现轻度分化，细胞球状体中心常出现细胞坏死。更重要的是，在常规培养方法中，由于重力的作用，分离的细胞在培养液中自然沉降，限制了细胞与细胞、细胞与基质之间的三维随机组合与共同定位(co - localization) ，细胞间无法实现类似胚胎发育过程中的三维接触和按极性的定向排列，因此只能呈现二维生长，在培养器皿表面平铺，不能形成立体结构[10]。
生物反应器模拟的微重力环境弥补了常规细胞培养的缺点，开辟了体外细胞培养的新纪元，也为组织构建提供了技术支持。
模拟微重力环境具有如下特点:①低剪切力对细胞无机械性损伤，它是通过固体旋转匹配微载体和培养液的浓度来实现的；②富含氧而不引起涡流，物流转移***。气体渗透膜则提供了被动的气体交换，它为适宜的生长环境提供了气体，防止了湍动引起的气泡/气室[11]；RCCS-3D，意为’RotaryCellCultureSystem’,即旋转培养系统。③随机化的重力向量(randomized gravitational vectors) 可能直接影响基因表达，或间接促进细胞自分泌/ 旁分泌，有利于细胞间信号转导 ；④细胞有一定程度的自由三维空间，有利于细胞—细胞、细胞—基质间按组织学特性相互接触，有利于细胞分化，且不易形成坏死中心[10]；⑤微重力在组织培养时还具有高保真度的优点。
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RCCS-3D旋转微重力三维细胞培养系统与传统静态培养系统对比？
传统静态细胞培养是在培养瓶或皿中进行的 。细胞或组织均生长在二维平面空间并接触玻璃或塑料表面，RCCS，这样的方式会影响细胞中基因的表达且无法持续生长及分化。“RCCS-3D旋转微重力三维细胞培养系统与传统静态培养系统对比？”同时平面培养的细胞还会发生“去分化”(dedifferentiation)现象，RCCS-3H，使培养的细胞逐渐失去其来源组织的许多生理特征。而大部分动态培养系统中， 细胞或组织是有物理的外力而悬浮的， 有许多包括液态剪切力在内的因素会导致细胞及组织损伤。如前所述，RCCS生物反应器提供了非常好的质量传递和低机械应力允许了3D聚合物的形成。旋转的目的是要让所有细胞均匀交换养分和气体，并且细胞和细胞之间可有足够的接触 ，有利于细胞聚集。另外不论是培养盘或培养管柱背侧均具备硅胶制成的换气膜以利进行X气体交换，使细胞、组织得到充分氧气及排除代谢后的废气 。
生长其中的细胞或组织是以自由落体的状态悬浮，没有搅拌器、气泡等破坏性力，故组织在培养液中得以自由降落、翻转并与培养液充分混合，其容器内各方向的力量达到平衡，所以细胞、组织不会受到单一方向的力影响，可朝任意方向均匀生长，是目前唯X一可使细胞自由生长分化，增加细胞增殖速率，减少细胞和有效增加细胞产物分泌的系统。且相比其他的三维细胞培养系统，RCCS系统可以克服长期困扰三维细胞培养的内生(ingrowth)不足的限制，从而可以真正用来培养工程组织(engineeredtissue)，使之用于、医学研究及再生医学、细胞疗法。常见的伪三维培养方法或系统有转瓶培养、摇瓶培养、悬滴培养、支架培养等，这些方法只是适当地改善了传统的2D培养（培养皿培养），但因为重力的存在，新生的细胞自由落体，从而导致细胞平铺生长，很难得到较接近生物体的三维形态结构体。
