RWVB(RCCS-3D)微重力三维细胞培养系统在实际应用中的表现?
现在认为,常规方法无法实现完全意义上的组织重建, 即由离体细胞完全在体外重建组织。备注:以上是大体的类别,如需进一步了解详细情况,欢迎与我们联系索取相关资料。其主要原因是:静止培养时,由于培养容器中的营养物质、气体及代谢产物浓度不均一,动态细胞培养RCCS-H, 容易导致载体内代谢废物蓄积,局部pH 值升高,中心部位的细胞不能获得充足的养分,生长迟缓或停滞[9] 。因而细胞只能呈单层生长,细胞密度低,无分化现象。搅拌式发酵罐培养虽然可以克服静止培养的缺点,但由于培养液被搅动时产生的高剪切力,极易损伤细胞,并抑制细胞的组织特异性分化。搅拌培养一般只能获得直径在1mm以下的多细胞球状体,细胞呈现轻度分化,细胞球状体中心常出现细胞坏死。更重要的是,在常规培养方法中,由于重力的作用,分离的细胞在培养液中自然沉降,限制了细胞与细胞、细胞与基质之间的三维随机组合与共同定位(co - localization) ,细胞间无法实现类似胚胎发育过程中的三维接触和按极性的定向排列,因此只能呈现二维生长,在培养器皿表面平铺,不能形成立体结构[10]。
生物反应器模拟的微重力环境弥补了常规细胞培养的缺点,开辟了体外细胞培养的新纪元,也为组织构建提供了技术支持。
模拟微重力环境具有如下特点:①低剪切力对细胞无机械性损伤,它是通过固体旋转匹配微载体和培养液的浓度来实现的;②富含氧而不引起涡流,物流转移***。其主要原因是:静止培养时,由于培养容器中的营养物质、气体及代谢产物浓度不均一,容易导致载体内代谢废物蓄积,局部pH值升高,中心部位的细胞不能获得充足的养分,生长迟缓或停滞[9]。气体渗透膜则提供了被动的气体交换,它为适宜的生长环境提供了气体,防止了湍动引起的气泡/气室[11];③随机化的重力向量(randomized gravitational vectors) 可能直接影响基因表达,或间接促进细胞自分泌/ 旁分泌,有利于细胞间信号转导 ;④细胞有一定程度的自由三维空间,动态细胞培养RCCS-3D,有利于细胞—细胞、细胞—基质间按组织学特性相互接触,有利于细胞分化,动态细胞培养,且不易形成坏死中心[10];⑤微重力在组织培养时还具有高保真度的优点。
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RCCS(RWVB)一种真正的三维细胞培养系统!
1 培养液***充满培养容器,避免了运动中液体湍流的产生和气泡的产生,从而避免了液体湍流或气泡对细胞的正常生长的影响;
2 模拟微重力环境,客服了细胞的自由落体,使得细胞更容易生长并形成三维的组织结构,保留更多的生物特征;
3 动态的培养,细胞生长过程中,悬浮于培养液内部,RCCS-D动态细胞培养,并随着系统的运动而随机地运动;
4 系统适用范围广,系统提供了多个尺寸供用户选择,可适用于无支架培养、有支架培养、微载体培养等多种需求,而不局限于某一种培养需求,且可以培养出尺寸较大的细胞或类组织;
Kinoshita等[14] 将骨祖细胞接种于三维网状胶原支架内复合培养, 12周后检测发现骨祖细胞在该状态下出现良好的增殖分化表现, 形成了类似于正常骨组织的结构。4、细胞有一定程度的自由三维空间,有利于细胞—细胞、细胞—基质间按组织学特性相互接触,有利于细胞分化,且不易形成坏死中心。将细胞与材料复合体置于培养瓶中进行简单的三维培养时, 出现了细胞分布不均匀、深部细胞营养交换障碍等问题, 因此目前进行三维培养时往往需要使用生物反应器。
研究表明, 旋转式细胞培养系统比较适宜培养组织工程骨。1培养过程中,细胞或组织悬浮于培养液中并随同培养液低速旋转、运动,更贴近于生命体内的真实环境。Terai 等[15] 将旋转式细胞培养系统增加气体交换装置后, ***解决了支架材料中O2 渗透和CO2 排除的问题,BMSCs 与聚乳酸/乙醇酸(PGLA) 构建的组织工程骨在该反应器中,培养 2 周时出现钙化情况, 培养 7 周时细胞即被形成的骨样组织包裹。____摘录自“模拟微重力培养在骨和组织工程中的应用”