藻酸盐三维细胞培养系统在骨组织工程中的应用研究进展.方法 广泛查阅近年来有关藻酸盐三维细胞培养系统在骨组织工程应用研究的文献进行综述.结果 藻酸盐具有良好的生物相容性,无1毒、对宿主无原性和生物可降解等独特的物理、化学和生物特性,藻酸盐三维细胞培养系统仍然是迄今理想的骨组织工程支架 材料之一.结论 藻酸盐三维细胞培养系统不仅将广泛应用于生命科学基础研究,作为一种理想的组织移植的支架材料,有望逐步走向临床应用.
细胞传代的一般方法?
开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全:一般主要有:细胞(单层细胞,镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH 培养液或MEM 培养液或199 等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血X清、庆大溶液(1 万单位)、7.5%NaHC03 溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS 洗液。
用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1)、细胞吹打管(20 ml)(以上用具需经121℃至
少15 分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、—20℃冰箱
操作步骤:镜检细胞,挑选生长状态良好,细胞界限清晰,RCCS-4D,具有立体感,形态好***、无异常及可X疑病变细胞。配制细胞培养液:按以下配比配制MEM-0.2%LH 培养液100ml 内,加入灭活小牛血X清10m1,庆大溶液0.3m1,7.5%碳酸氢钠溶液3ml。(仅供一般参考)。消化细胞;先用PBS 洗液冲洗细胞表面1-2 次,每次10m1,弃去洗液,向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,细胞瓶平放,RCCS-3D,使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1 细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中,再加入10m1 细胞培养液重复吹打一次后分装,然后补加至所需培养量。加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4 天成片。(由细胞接种浓度决定);填写传代记录。
什么是传代细胞培养?
原代细胞或细胞株或细胞系需在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的原代细胞或细胞株或细胞系或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续,RCCS-2D,这个过程体外培养称为传代细胞培养。一般认为,细胞培养形成单层汇合,RCCS,细胞密度与生存空间有密切的关系,将培养细胞分散,以1:2或l:3或1:4以上的比率转移分散进行培养,即为传代细胞培养。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数期和停止期。