RCCS-3D模拟微重力环境三维动态培养系统的代表?旋转式细胞培养系统(以下简称RCCS)生物反应器是如何工作的。
不同组织来源的细胞在传统的两维细胞培养条件下生长时,由于在标准重力环境中,尽管细胞可在网状支架上粘附,所建立的三维培养体系由于重力的作用,细胞在支架上分布不均匀,往往集中在支架靠近下面的一侧,这样很可能会影响三维培养体系作为移植物应用的实际效果,阻碍组织特异性分化,RCMW,丧失其特征和发生去分化,形成的聚集出现中央坏死,因此体外高密度三维(three-dimension-al3-D)细胞培养较难1;而微重力反应器在旋转过程中,重力向量持续随机化而形成一定程度的三维空间自由,有利于细胞有选择的、均匀地分布于支架的表面,是避免这一问题常用的有效方法,可以保持所培养细胞的组织分化特异性。1模拟微重力培养的特点和实用性旋转细胞培养系统(rotatingcellculturesystemRCCS)是具有代表性的一种微重力反应器,应用较为普遍。RCCS源自美国航空航天局(NANS),是一种水平旋转、充满液体的圆柱形悬浮培养容器,提供模拟微重力环境_____《微重力反应器在细胞培养中的应用》一文。
RCCS-3D模拟微重力三维细胞培养系统培养容器应该以什么速度旋转?
没有固定的标准速度,主要这取决于细胞聚合体的大小和其自身的重量。当RCCS-3D模拟微重力三维细胞培养系统容器转动时,随着细胞的不断生长、聚集,其聚合体的下坠趋势也在不断增加。 根据斯托克斯方程,沉降速率随着细胞聚合体半径的平方而增加。因此,随着细胞聚合体体积增加,它们沉降的更迅速,有必要增加旋转速度。因此,"组织工程"这一名词恰如其分地表达了这一学科的内涵:组织工程是"应用工程学和生命科学的原理和方法来解释正常的和病理的哺乳类动物组织的基本结构-功能关系,并且发展具有生物活性的人工替代物来恢复、维持或提高组织的功能"[2]。因此,一开始使用RCCS-3D模拟微重力三维细胞培养系统,可能以慢速旋转培养,当细胞聚合体在体积上增长并且变得可见,再增加旋转的速度。
一百年前,悬滴法是微生物学常用的,用这种方法,灌流培养RCMW,罗伯特·科赫能够次看到显微镜下培养的杆X菌X和活埃博拉病毒弧菌在埃及的污染水域。 该方法很简单:只需将一滴含有微生物的水放在显微镜载玻片的表面上,并用快速手转将其倒转,RCMW连续灌注,使水滴从载玻片上悬浮,由表面张力维持。 在水滴内,微生物自由移动并且可以用光学显微镜观察。 水滴内的微生物被限制在水滴中,不能穿过水 - 空气界面,因此不能接触表面而附着。公司,中间没有其它环节,确保产品质量和提供满意的技术服务支持。 相同的原则,今天使用创建微观3D细胞聚集。
大约在同一时间,大约1880年,儒勒·凡尔纳出版了一个讽刺小说“从地球到月球”,关于人类在空间飞行,在炮X弹X壳内到达地球的卫X星的可能性。 但是,只有大约一百年后,人类在月球上行走,由火箭和推进装置的复杂组合X运输。
早在1961年,美国科学家对研究太空飞行对细胞生物学的影响感兴趣,并在Discoverer卫X星XXIX和XXX(1)(2)中进行器X官和细胞培养实验。 两个基本的物理因素是本研究的目标:重力和电磁辐射对活生物体的影响,从单细胞到胚胎发育和到成熟X的复杂生物体。不,细胞和细胞聚集体会在培养基中漂浮,这是生物反应器中观察到的高物质传输的重要因素之一。
从1966年到1969年,NASA推出了“生物卫X星”作为研究计划的一部分,以评估航天,特别是微重力对生命过程的影响,研究基本的细胞生物化学,细胞和组织的生长结构,连续灌流RCMW,生长和植物和动物的形式。 类似地,一个国际科学家组织与Cosmos 1129进行的另一个生物空间研究计划提供了关于和生物发育行为的重要数据,通过用胡萝卜胚胎证实微重力中培养的可以产生胚胎和体细胞胚,并且空间低重力环境可以支持已经组织的体细胞胚的正常生长,产生完全发育的苗(3)。从所有这些早期实验获得至少两个基本结论:A)细胞寿命和一般结构不是重力依赖性的。因此,3D细胞培养既能保留体内细胞微环境的物质结构基础,又能体现细胞培养的直观性及条件可控制性,把体外无细胞及单层细胞培养体系与组织器X官及整体研究联系起来。 B)胚发生也是重力无关的
在20世纪80年代的航天飞行任务期间,NASA生命科学部门对微重力对细胞行为的影响进行了研究。 这项研究的主要目的是分析对生物的失重状态的影响,因为在轨道这是正常的环境。 不幸的是,由于在货物的预发射载荷和轨道飞行阶段之间,细胞不处于微重力条件下的事实,结果是不确定的。 在这些实验之后,科学家意识到这种在空间飞行器上进行的研究是有限的,但它可以在地球上用特殊技术模拟。RCCS-3D旋转微重力三维细胞、组织培养该系统两种原始的RCCS培养容器由SYNTHECON制造——即STLV和HARV。 不久,重力归/令人不安的仪器,如回转器,随机定位机(RPM),自由落体机(FFM)和抛物线飞行飞机被开发。