RWVB(RCCS-3D)微重力三维细胞培养系统在实际应用中的表现?
现在认为,常规方法无法实现完全意义上的组织重建, 即由离体细胞完全在体外重建组织。其主要原因是:静止培养时,由于培养容器中的营养物质、气体及代谢产物浓度不均一, 容易导致载体内代谢废物蓄积,局部pH 值升高,中心部位的细胞不能获得充足的养分,生长迟缓或停滞[9] 。3部分系统使用第三方耗材,如培养瓶、培养管之类,无法***材料的质量,且通透性差。因而细胞只能呈单层生长,RCCS-4D,细胞密度低,无分化现象。搅拌式发酵罐培养虽然可以克服静止培养的缺点,但由于培养液被搅动时产生的高剪切力,极易损伤细胞,并抑制细胞的组织特异性分化。搅拌培养一般只能获得直径在1mm以下的多细胞球状体,细胞呈现轻度分化,细胞球状体中心常出现细胞坏死。更重要的是,在常规培养方法中,由于重力的作用,分离的细胞在培养液中自然沉降,限制了细胞与细胞、细胞与基质之间的三维随机组合与共同定位(co - localization) ,细胞间无法实现类似胚胎发育过程中的三维接触和按极性的定向排列,因此只能呈现二维生长,在培养器皿表面平铺,不能形成立体结构[10]。
生物反应器模拟的微重力环境弥补了常规细胞培养的缺点,开辟了体外细胞培养的新纪元,也为组织构建提供了技术支持。
模拟微重力环境具有如下特点:①低剪切力对细胞无机械性损伤,它是通过固体旋转匹配微载体和培养液的浓度来实现的;②富含氧而不引起涡流,物流转移***。气体渗透膜则提供了被动的气体交换,它为适宜的生长环境提供了气体,防止了湍动引起的气泡/气室[11];③随机化的重力向量(randomized gravitational vectors) 可能直接影响基因表达,或间接促进细胞自分泌/ 旁分泌,有利于细胞间信号转导 ;④细胞有一定程度的自由三维空间,有利于细胞—细胞、细胞—基质间按组织学特性相互接触,有利于细胞分化,且不易形成坏死中心[10];⑤微重力在组织培养时还具有高保真度的优点。1模拟微重力培养的特点和实用性旋转细胞培养系统(rotatingcellculturesystemRCCS)是具有代表性的一种微重力反应器,应用较为普遍。
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RCCS生物反应器有什么不同的应用?
RCCS生物反应器的初目的是模仿微重力。在使用这台反应器用于地面实验期间,我们发现这些反应器中的细胞形成3D聚合体。将细胞与材料复合体置于培养瓶中进行简单的三维培养时,出现了细胞分布不均匀、深部细胞营养交换障碍等问题,因此目前进行三维培养时往往需要使用生物反应器。从那以后,这些RCCS生物反应器被用于细胞和组织培养的几个领域。 RCCS生物反应器的应用范围从基础细胞生物学到航天生物学,培养以及再生医学和开发,在将来,RCCS-2D,也许应用于疾病的和损伤治x疗。对于RCCS生物反应器的各种各样应用的详细说明,请联系我们。
与其他三维细胞培养系统相比,RCCS生物反应器的优点是什么?
将细胞嵌入盘或者多孔板的三维细胞外基质为近常用的三维细胞培养方法。这个方法虽然可以产生相对不错的3D组织模型,但是它又被有限的物质传递(这是由于培养的静态特性,也因为基质对于物质传输是一个额外的屏障)和缺乏可测量性所限制。因此,"组织工程"这一名词恰如其分地表达了这一学科的内涵:组织工程是"应用工程学和生命科学的原理和方法来解释正常的和病理的哺乳类动物组织的基本结构-功能关系,并且发展具有生物活性的人工替代物来恢复、维持或提高组织的功能"[2]。动态的培养系统,RCCS,例如搅拌瓶,或者大规模的搅拌罐提供了非常好的物质传递,但是这些系统使用的机械应力,不仅损坏细胞,而且还阻止了它们的聚集。如前所述, RCCS生物反应器提供了非常好的质量传递和低机械应力允许了3D聚合物的形成。很多基于本生物反应器的研究显示了其在3D细胞培养方面的优势。以下链接为成功运用RCCS生物反应器进行3D细胞培养的各种不同研究的文献。
当我通过平板培养得到好的结果时为什么我要换成3D细胞培养?
二维细胞培养对我们对细胞生物学的理解做出了很大的贡献,但是能从中获取的信息量还是有限制性的。这门交叉学科的核心是应用生物学和工程学的原理和方法来发展具有生物活性的人工替代物,用以维持、恢复或提高人体组织的功能。科学家虽然对过去100年的传统细胞培养技术很满意,但是这不再具有必要性。组织培养,根据定义,尽量模拟体内环境,并且很显然,活着的生物日是三维的,而不是二维的。因此,为了建立模拟体内生物学模型,体外培养系统一定变成三维的。
RCCS(RWVB)一种真正的三维细胞培养系统!
1 培养液***充满培养容器,RCCS-4DQ,避免了运动中液体湍流的产生和气泡的产生,从而避免了液体湍流或气泡对细胞的正常生长的影响;
2 模拟微重力环境,客服了细胞的自由落体,使得细胞更容易生长并形成三维的组织结构,保留更多的生物特征;
3 动态的培养,细胞生长过程中,悬浮于培养液内部,并随着系统的运动而随机地运动;
4 系统适用范围广,系统提供了多个尺寸供用户选择,可适用于无支架培养、有支架培养、微载体培养等多种需求,而不局限于某一种培养需求,且可以培养出尺寸较大的细胞或类组织;